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助攀科峰

文中部分實(shí)驗(yàn)在生物醫(yī)學(xué)科學(xué)與工程學(xué)院生物醫(yī)學(xué)分析測試中心完成，使用流式測試平臺(tái)12色流式細(xì)胞儀（BD/FACSCelesta）支撐文中部分測試數(shù)據(jù)。

/助攀科峰/

納米載體能夠改善免疫制劑在體內(nèi)的分布和代謝，增強(qiáng)藥物與免疫細(xì)胞的相互作用等克服免疫治療的限制因素，從而在腫瘤免疫治療上表現(xiàn)出巨大潛力。然而，精確調(diào)控抗腫瘤免疫的激活仍然是一個(gè)巨大挑戰(zhàn)。腫瘤內(nèi)源性刺激如微酸、還原性、酶和乏氧等可激活的響應(yīng)性納米藥物，特異性在腫瘤部位釋放免疫制劑，降低免疫治療的副作用，以改善抗腫瘤效果。另一方面，外源性刺激如光、熱、超聲和電磁輻射等不受機(jī)體生理、病理因素影響，為免疫治療提供在時(shí)空上可控制的方法。光動(dòng)力學(xué)療法是在外源性光照射下，可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞免疫原性死亡，增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)。因此，聯(lián)合內(nèi)源性和外源性刺激構(gòu)建響應(yīng)性納米制劑有望進(jìn)一步精準(zhǔn)調(diào)控和提高抗腫瘤免疫反應(yīng)。

基于此，研究團(tuán)隊(duì)通過整合內(nèi)源性和外源性刺激的優(yōu)點(diǎn)，發(fā)展了一種智能半導(dǎo)體聚合物納米免疫調(diào)節(jié)劑，用于腫瘤微酸環(huán)境激活的精準(zhǔn)光動(dòng)力免疫治療。研究人員利用腫瘤微酸響應(yīng)的化學(xué)鍵將TLR7激動(dòng)劑（R837）鍵合在兩親性聚合物上，同時(shí)利用該聚合物包載近紅外光響應(yīng)的光敏材料，構(gòu)建雙重響應(yīng)型納米免疫制劑。該納米制劑經(jīng)過系統(tǒng)給藥后在腫瘤部位富集，在外源性激光照射下殺傷腫瘤細(xì)胞和誘導(dǎo)腫瘤免疫原性死亡，同時(shí)在內(nèi)源性腫瘤微酸刺激下釋放免疫佐劑；在腫瘤微環(huán)境中，釋放的免疫原性因子（腫瘤相關(guān)抗原和損傷相關(guān)分子模式）和佐劑協(xié)同發(fā)揮作用，可以作為原位腫瘤疫苗，激活專職抗原提呈細(xì)胞-樹突狀細(xì)胞，從而進(jìn)一步提高抗腫瘤免疫治療。該體系為實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)調(diào)控的腫瘤聯(lián)合免疫治療提供了新的思路。

研究成果以“Tumor-Microenvironment-Activatable Polymer Nano-Immunomodulator for Precision Cancer Photoimmunotherapy”為題發(fā)表在國際權(quán)威學(xué)術(shù)期刊Advanced Materials，全文鏈接https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/adma.202106654。

支撐表征測試設(shè)備介紹

生物醫(yī)學(xué)分析測試中心打造了流式測試平臺(tái)，計(jì)劃共享4臺(tái)不同型號(hào)的流式細(xì)胞儀，面向校內(nèi)外師生開放共享使用，目前已開放4色流式細(xì)胞儀（BD/Accuri C6 Plus）、12色流式細(xì)胞儀（BD/FACSCelesta）預(yù)約共享。即將新開放共享8色流式細(xì)胞儀（BD/FACS CantoTMⅡ）、18色流式細(xì)胞儀（BD/LSRFortessaTM）。以下為每臺(tái)設(shè)備的詳細(xì)信息，如對(duì)儀器設(shè)備有使用需求的校內(nèi)外師生，近期可以持續(xù)關(guān)注平臺(tái)的培訓(xùn)和考核通知。

4色流式細(xì)胞儀

（BD/Accuri C6 Plus）

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性能參數(shù)

1.BD Accuri C6 Plus光路信息：

2.可支持的熒光染料：

3.跨越107.2的超高動(dòng)態(tài)范圍，免調(diào)電壓

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功能與用途

BD Accuri C6 Plus可用于檢測細(xì)胞活性、細(xì)胞調(diào)亡檢測、細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)、細(xì)胞特異性抗原表達(dá)、細(xì)胞因子檢測、蛋白質(zhì)磷酸化檢測、細(xì)胞周期分析等。

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預(yù)約信息

地點(diǎn)：華南理工大學(xué)國際校區(qū)C1c905

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：校內(nèi)1.34/分鐘、校外2.68/分鐘

管理員：楊老師（電話：81181694 QQ:570063412）

預(yù)約步驟：“華南理工大學(xué)設(shè)備共享平臺(tái)”-“生物醫(yī)學(xué)科學(xué)與工程學(xué)院”-“4色流式細(xì)胞儀”即可預(yù)約

12色流式細(xì)胞儀

（BD/FACSCelesta）

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性能參數(shù)

1.激光器：488nm Blue Laser；633nm Red Laser；405nm Violet Laser，所有光學(xué)通道配插拔式濾光片，使用者可自行更換濾片，更換濾片后無需任何光路校準(zhǔn)或校正。

2.可支持的熒光染料（最高可測12色熒光）：

3.熒光靈敏度：FITC≤25MESF、PE≤15MESF。

4.樣品分析速度：≥25000細(xì)胞/秒，樣品交叉污染率：≤0.5％。

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功能與用途

免疫表型分析、細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)、白血病免疫分型、HLA-B27檢測、DNA細(xì)胞周期和倍體分析、DNA直方圖、造血干細(xì)胞檢測、血小板活化、凋亡分析、FRET分析、體液細(xì)胞因子檢測、胞內(nèi)蛋白磷酸化檢測、四色Dimer分析、特異性抗原刺激胞內(nèi)細(xì)胞因子檢測等。

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預(yù)約信息

地點(diǎn)：華南理工大學(xué)國際校區(qū)C1c805

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：校內(nèi)2.5元/分鐘、校外5元/分鐘

管理員：沈老師（電話：81181694 QQ:570063412）

預(yù)約步驟：“華南理工大學(xué)設(shè)備共享平臺(tái)”-“生物醫(yī)學(xué)公共實(shí)驗(yàn)平臺(tái)”-“12色流式細(xì)胞儀”即可預(yù)約。

8色流式細(xì)胞儀

（BD/FACS CantoTMⅡ）

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性能參數(shù)

1.激光器：488nm固態(tài)激光器激發(fā)4色熒光；633nm氦氖激光器激發(fā)2色熒光；405nm激光器激發(fā)2色熒光。

2.可支持的熒光染料（最高可測8色熒光）：

3.檢測方式：180*430μm矩形石英流動(dòng)檢測室。

4.最小樣本量≤50μL，適合微量樣本和稀有樣本的檢測，樣本流速范圍：10-120μL/分鐘，可達(dá)到10000個(gè)細(xì)胞/秒，樣本交叉污染率＜0.1%。

5、激光光路固化，無需人工調(diào)試校正光路。

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功能與用途

免疫表型分析、細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)、白血病免疫分型、HLA-B27檢測、DNA細(xì)胞周期和倍體分析、DNA直方圖、造血干細(xì)胞檢測、血小板活化、凋亡分析、FRET分析、體液細(xì)胞因子檢測、胞內(nèi)蛋白磷酸化檢測、四色Dimer分析、特異性抗原刺激胞內(nèi)細(xì)胞因子檢測等。

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預(yù)約信息

地點(diǎn)：華南理工大學(xué)國際校區(qū)C1a135

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：校內(nèi)2.5元/分鐘、校外5元/分鐘

管理員：許老師

計(jì)劃近期開放共享，如有需求使用，請(qǐng)加入生物醫(yī)學(xué)分析測試中心及培訓(xùn)群（QQ:570063412）

18色流式細(xì)胞儀

（BD/LSRFortessaTM）

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性能參數(shù)

1.激光器：紫外色激光器(355nm）激發(fā)3色熒光、紫色激光器(405nm）激發(fā)6色熒光、藍(lán)色激光器(488nm）激發(fā)2色熒光、黃綠色激光器（561nm）激發(fā)4色熒光、紅色激光器（640nm）激發(fā)3色熒光.

2.可支持的熒光染料（最高可檢測18色熒光）：

3.檢測方式：配備430 x 180 μm高精度檢測石英流動(dòng)室。

4.氣壓泵正壓上樣，密閉系統(tǒng)不容易進(jìn)氣泡，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

5.前向角散射光靈敏度：可檢測顆粒范圍0.2um顆粒。

6.樣品分析速度：≧40000細(xì)胞/秒。

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功能與用途

淋巴細(xì)胞亞群分析、其它免疫細(xì)胞分析，如樹突狀細(xì)胞，抗原特異性細(xì)胞，單核細(xì)胞等；基因轉(zhuǎn)染，如熒光蛋白GFP/CFP/YFP等檢測以及FRET等蛋白間相互作用等研究細(xì)胞周期及倍體分析；白血病免疫分型；干細(xì)胞及腫瘤干細(xì)胞分析，干細(xì)胞階段分化發(fā)育，以及分化發(fā)育的機(jī)制；各種類型稀有細(xì)胞的檢測鑒定；細(xì)胞凋亡、增殖和信號(hào)傳導(dǎo)。

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預(yù)約信息

地點(diǎn)：華南理工大學(xué)國際校區(qū)C1a135

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：校內(nèi)2.5元/分鐘、校外5元/分鐘

管理員：張老師

計(jì)劃近期開放共享，如有需求使用，請(qǐng)加入生物醫(yī)學(xué)分析測試中心及培訓(xùn)群（QQ:570063412）

信息來源：華南理工大學(xué)生物醫(yī)學(xué)科學(xué)與工程學(xué)院